Isolation, cultivation and immunofluorescence characterization of lamellar keratinocytes from equine hoof by using explants / Isolamento, cultivo e caracterização por imunofluorescência de queratinócitos lamelares de casco equino utilizando explantes

The importance of the hoof to the horse health is clear, and the current knowledge regarding the cellular aspects of hoof keratinocytes is poor. Studies on equine keratinocyte culture are scarce. Developing keratinocyte cultures in vitro is a condition for studies on molecular biology, cell growth and differentiation. Some methods have already been established, such as those for skin keratinocyte culture. However, few methodologies are found for lamellar keratinocytes. The objective of this study was to standardize the equine hoof keratinocyte isolation and cultivation, and then characterize the cell immunophenotype. For this, the primary culture method used was through explants obtained from three regions of the equine hoof (medial dorsal, dorsal, and lateral dorsal). After the cell isolation and cultivation, the cell culture and its explants were stained with anti-pan cytokeratin (pan-CK) (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4), and Ki-67 (MIB-1) antibodies. Cells were grown to third passage, were positive for pan-CK, p63 and Ki-67, and few cells had vimentin positive expression. As for the explants, the epidermal laminae were not stained for vimentin or Ki-67. However, some cells presented positive pan-CK and p63 expression. This study demonstrated the viability of lamellar explants of equine hooves as a form of isolating keratinocytes in primary cultures, as well as characterized the proliferation ability of such keratinocytes in monolayers.(AU)

É notória a importância do casco na saúde dos equinos, mas o conhecimento em nível celular é pouco entendido. Estudos envolvendo o cultivo de queratinócitos equinos são escassos. Sabe-se que o desenvolvimento de cultivos de queratinócitos in vitro é uma condição para estudos sobre a biologia molecular, crescimento e diferenciação celular. Alguns métodos já estão estabelecidos, como para cultivo de queratinócitos de pele, mas poucas metodologias são encontradas para queratinócitos lamelares. O objetivo desse estudo foi padronizar o cultivo de queratinócitos provenientes de casco equino visando futuramente associar ao estudo da medicina regenerativa para assim estabelecer um modelo experimental in vitro e indicar o uso criterioso de terapias regenerativas para a laminite equina. Desta forma, o cultivo em monocamada e a caracterização de queratinócitos lamelares foram realizados. Para isso, o método de cultura primária utilizado foi através de explantes obtidos de três regiões do casco (dorso-medial, dorsal e dorso-lateral). As células foram caracterizadas para os marcadores anti pan-cytokeratin (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4) e Ki-67 (MIB-1) nos cultivos e nos explantes. As células foram cultivadas até terceira passagem, tendo marcação positiva para pan-CK, p63 e Ki-67 e fraca marcação para vimentina. Já as lâminas epidermais não tiveram marcação de vimentin e Ki-67, porém marcaram acentuadamente para pan-CK e p63. Este estudo demonstrou a exiquibilidade do uso de explantes lamelares do casco de equinos, como forma de isolamento de queratinócitos em cultivos primários, bem como caracterizou a habilidade de proliferação desses queratinócitos em monocamada.(AU)

Relação espacial entre a falange distal e o estojo córneo em éguas Campolinas jovens com e sem sinais de obesidade / Spatial relationship between the distal phalanx and the hoof capsule in young Campolina mares with and without obesity

Estudos prévios têm demonstrado alterações radiográficas em cascos de equinos obesos. Os objetivos foram estudar, com avaliação radiográfica, a relação espacial entre estojo córneo e falange distal de éguas jovens da raça Campolina com e sem obesidade. Foram utilizadas 22 éguas entre três e cinco anos de idade, sendo analisadas varáveis de adiposidade e medidas radiográficas dos cascos dos membros torácicos de éguas com escore corporal de 5 a 7/9 (Grupo Controle) e de 8 a 9 (Grupo Obeso). Foram feitas comparações entre os grupos e correlacionaram-se as variáveis de adiposidade entre si, variáveis adiposidade com variáveis casco e variáveis de casco entre si. Utilizou-se o teste t de Student para variáveis paramétricas e o teste Mann-Whitney para as não-paramétricas, para as medidas de correlação, utilizou o teste de Pearson para duas amostras paramétricas e o teste de Spearman para comparações que envolvam pelo menos uma variável não paramétrica (P<0,05). Os resultados demonstraram que éguas Campolinas obesas, ainda jovens, já apresentam indícios de alteração na relação espacial entre estojo córneo e falange distal.(AU)

Previous studies have demonstrated radiographic changes in the hoof of obese horses. The objective was to study through radiographic evaluation the spatial relationship between the hoof capsule and the distal phalanx of Campolina mares with and without obesity. Twenty-two Campolina mares 3 to 5 years old were used. We analyzed adiposity variables and radiographic measurements of the hoof of both forelimbs of mares with body condition score from 5 to 7/9 (Control group) and from 8 to 9 (Obese group). Comparisons were made between groups using the Student t test for parametric variables and the Mann-Whitney test for the nonparametric ones. Pearson or Spearman tests were used to evaluate the correlation among parametric and nonparametric variables respectively (P<0.05). Evidences of changes in the spatial relationship between the hoof capsule and the distal phalanx were observed in obese Campolina young mares.(AU)

Response of three digital anesthetic technics in horses with forelimb hoof lameness / Resposta de três técnicas anestésicas digitais em equinos com claudicação dos membros anteriores ligada ao casco

The presented study aimed to assess objectively the response of distal interphalangeal joint (DIJ), navicular bursa (NB) and deep digital flexor tendon sheath (DDFTS) anesthesia in horses with forelimb hoof lameness; and evaluate if the presence of radiographic abnormalities on navicular bone could interfere on blocks' results. Fifteen horses with lameness improvement above 70% after palmar digital nerve (PDN) block were selected for this study. Blocks were assessed separately on five consecutive trials at seven different time-points. The fifth trial was performed to evaluate the influence of exercise on preexisting lameness. Most of horses (73.33%) presented pain related to the podotrochlear apparatus based on clinical and lameness exam and blocks' responses. NB and DIJ anesthesia differed on the frequency of horses with lameness improvement above 70% only at 10min (p=0.03), and both differed from DDFTS block until 30'(p<0.05). The blocks' response was variable along the time and the highest means for NB, DIJ and DDFTS were observed at 5-10 minutes ('), 15-20' and 10-15' respectively.Exercise had low interference on lameness intensity since no improvement above 50% was observed and an increase on lameness intensity over time was identified in seven horses. Variable grades of navicular bone radiographic lesions were observed in 14 horses, although these lesions had no interference on blocks' response (p>0.05). The NB and DIJ blocks had similar responses and both were superior to DDFTS anesthesia, coincident with a major prevalence of podotroclear apparatus abnormalities in this equine population.(AU)

O presente estudo avaliou, de forma objetiva, as respostas do bloqueio da articulação interfalangeana distal (AID), da bursa do navicular (BN) e da bainha do tendão flexor digital profundo (BTFDP) em equinos com claudicação ligada ao casco nos membros torácicos; além de analisar a influência das alterações radiográficas do osso navicular no resultado dos bloqueios. Quinze cavalos, que apresentaram uma melhora da claudicação acima de 70% após o bloqueio do nervo digital palmar, foram selecionados para este estudo. Os bloqueios foram avaliados separadamente em cinco turnos consecutivos e em sete tempos diferentes. O quinto turno foi utilizado para analisar a influência do exercício sobre a claudicação preexistente. A maioria dos cavalos (73,33%) apresentou dor relacionada à porção palmar do casco, com base nos achados do exame clínico em movimento e nas respostas dos bloqueios. As anestesias da BN e da AID apresentaram diferença quanto à frequência de cavalos com melhora da claudicação acima de 70% apenas aos 10min (p=0.03), e ambos diferiram do bloqueio da BTFDP até os 30min (p<0.05). A resposta dos bloqueios foi variada ao longo do tempo, e as maiores médias de melhora da claudicação para os bloqueios BN, AID e BTFDP foram observadas aos 5-10min, 15-20min e 10-15min, respectivamente. O exercício teve pequena interferência na intensidade da claudicação, uma vez que nenhuma melhora acima de 50% foi observada e sete cavalos aumentaram a intensidade da claudicação ao longo do tempo. A presença de diferentes graus de lesão radiográfica do osso navicular foi observada em 14 cavalos, porém essas lesões não interferiram na resposta dos bloqueios (p>0,05). Os bloqueios da BN e da AID apresentaram respostas semelhantes, e ambos foram superiores ao bloqueio da BTFDP, coincidindo com uma marcada prevalência de doença do aparato podotroclear nesta população de equinos.(AU)

Laminar lesions in horses with systemic oxidative stress, committed by experimentally induced or naturally occurring gastrointestinal disorders / Lesões laminares em cavalos com estresse oxidativo sistêmico, acometidos por doenças gastrintestinais experimentalmente induzidas ou de ocorrência natural

Laminitis in horses can be associated with lesions in multiple organs secondary to sepsis. Twenty-one horses suffering from gastrointestinal disorders were used in the experiment; 7 horses with experimentally induced endotoxemia and intestinal ischaemia, and 14 horses suffering from naturally occurring colic syndrome. Tissue samples of lungs, liver, heart, brain, cerebellum and hoof laminar tissue were collected for histopathological and oxidative stress evaluation using nitrotyrosine and superoxide dismutase (SOD2) immunostaining. The horses were divided into two groups: the non-oxidative lesions group (NOLG), with 7 horses showing weak immunostaining in lungs, liver and kidney, and the oxidative lesions group (OLG), with 14 horses showing immunostaining indicating systemic oxidative stress in multiple organs. The horses from OLG showed increase of laminar lesions and SOD2 immunostaining in multiple organs when compared to the horses from the NOLG. No differences were found ln regard to laminar immunostaining by nitrotyrosine and SOD2 between experimental groups. It was concluded that systemic oxidative stress can be associated with the development of laminar lesions, and that the laminar tissue does not respond to oxidative stress with increase of SOD as occurs in other organs.(AU)

A laminite em equinos pode estar associada à lesão em múltiplos órgãos secundária a sepse. Foram utilizados 21 cavalos com afecções gastrintestinais, sendo sete com endotoxemia e isquemia intestinal induzidos experimentalmente, e 14 cavalos com síndrome cólica de origem natural. Amostras teciduais de pulmão, rim, fígado, coração, cérebro e cerebelo e de tecido laminar do casco foram coletadas para avaliação de lesão histopatológica e estresse oxidativo, pela imunomarcação de nitrotirosina e superóxido dismutase (SOD2). Os animais foram divididos em dois grupos: grupo sem lesão oxidativa (NOLG), com sete cavalos com fraca imunomarcação em pulmão, fígado e rim, e grupo lesão oxidativa (OLG), contendo 14 cavalos com imunomarcação indicando estresse oxidativo em múltiplos órgãos. Os cavalos do grupo OLG apresentaram aumento de lesões laminares e imunomarcação para SOD2 em múltiplos órgãos, quando comparados ao NOLG. Não houve diferença sobre a imunomarcação laminar para nitrotirosina e SOD2 entre os grupos experimentais. Conclui-se que o estresse oxidativo sistêmico está associado ao desenvolvimento de lesões laminares, e que o tecido laminar não responde ao estresse oxidativo com aumento de SOD como ocorre nos outros órgãos.(AU)

Histologic and inflammatory lamellar changes in horses with oligofructose-induced laminitis treated with a CXCR1/2 antagonist / Alterações histológicas e inflamatórias no tecido laminar de equinos submetidos ao modelo de laminite por oligofrutose e tratados com um antagonista para CXCR1/2

With the hypothesis that blocking chemokine signaling can ameliorate acute laminitis, the aim was to evaluate the therapeutic effect of intravenous DF1681B, a selective antagonist for CXCR1 and CXCR2 (chemokine receptors), in an oligofructose equine laminitis model. To twelve mixed breed clinically healthy hoses with no previous history of hoof-related lameness was administered oligofructose (10g/kg given by nasogastric tube) and divided into two groups: treated (intravenous DF1681B at 30mg/kg 6, 12, 18, and 24h after oligofructose) and non-treated groups. Laminar biopsies were performed before and 12, 36, and 72h after administering oligofructose. Samples were stained with periodic acid-Schiff (PAS) and scored from 0 to 6 according to epidermal cell and basal membrane changes. The IL-1β, IL-6, and CXCL1 RNA expressions were determined by RT-PCR. Parametric and non-parametric tests were used to compare times within each group (P<0.05). The PAS grades and IL-1β and IL-6 RNA expression increased in the non-treated group, but remained constant in the treated horses. In conclusion, DF1681B therapy reduced laminar inflammation and epidermal deterioration in treated horses. CXCR1/2 blockage should be considered therapeutically for equine acute laminitis.

A expressão de quimiocinas e a infiltração de leucócitos no tecido laminar são característicos de laminite aguda de equinos. O presente estudo avaliou o efeito terapêutico da administração intravenosa de DF1681B , um antagonista seletivo para CXCR1 e CXCR2 (receptores de quimiocinas), em um modelo de laminite equina por oligofrutose. Utilizaram-se doze cavalos sem raça definida, compreendendo quatro machos e oito fêmeas não gestantes, com idade (média ±SD) 7±3,5 anos, pesando 305±35kg e com uma pontuação média de condição corporal de 5±1/9. Os indivíduos elegíveis eram clinicamente saudáveis, sem história prévia de claudicação relacionados ao casco. Após administração de oligofrutose (10g/kg por sonda nasogástrica), os animais foram divididos em dois grupos: tratado (30mg/kg de DF1681B intravenosa, 6, 12, 18 e 24h após a oligofrutose) e não tratado, que recebeu placebo. Biópsias laminares foram realizadas antes e 12, 36 e 72h após a administração de oligofrutose. As amostras foram coradas com ácido periódico de Schiff (PAS) e classificadas de 0-6 de acordo com alterações nas células epidérmicas e na membrana basal. Também determinaram-se as expressões gênicas de IL-1β, CXCL1 e IL-6 por RT-PCR. Testes paramétricos e não paramétricos foram utilizados para comparar os momentos em cada grupo (P<0,05). Estatisticamente, os graus PAS e as expressões de IL-1β e IL-6 se elevaram após a indução no grupo não tratado, mas se mantiveram constantes nos cavalos tratados. Em conclusão, a terapia por DF1681B reduziu a inflamação laminar e a deterioração epidérmica em equinos submetidos ao modelo de intoxicação por oligofructose. O bloqueio de receptores CXCR1/2 deve ser considerado como uma opção terapêutica para prevenção da laminite aguda de equinos.

Microstructure of Holstein and Gir breed adult bovine hooves: histomorphometry, three-dimensional microtomography and microhardness test evaluation / Microestrutura de cascos de bovinos adultos das raças Holandesa e Gir: avaliação por histomorfometria, microtomografia tridimensional e teste de microdureza

This study aimed to characterize and compare the aspects involved in the microstructural formation of the Holstein and Gir breed hoof wall by histomorphometry, three-dimensional microtomography and microhardness test techniques. Seventy-two (18H/18G thoracic and 18H/18G pelvic) Holstein (H) and Gir (G) breed hooves were collected in slaughterhouses. The hooves were divided into six groups according to breed and age group: 24 to 36 months (C1H/C1G), 36 to 60 months (C2H/C2G) and over 60 months (C3H/C3G). The normality and homogeneity analysis of morphometric variables by the Kolmogrov-Sminov and Bartlett tests was conducted as a statistical model. Once the assumptions were met, the Sigmastat 3.5 software was used and the means were compared by T test. The 5% probability level is considered. When the assumptions were not met, the means were compared by the Mann-Whitney nonparametric test, considering the 5% probability level. When comparing the Holstein and Gir breeds, no differences were noticed between them as to the length of the dermal papillae; young animals showed thicker papillae than adult animals; the Holstein breed hooves showed higher amount of 7pores on the wall and on the sole compared to the Gir breed; Holstein cattle hooves showed greater microhardness than Gir cattle; there was no microhardness difference between pigmented and non-pigmented hooves of Holstein and Gir cattle.

O presente estudo objetivou caracterizar e comparar os aspectos envolvidos na formação microestrutural do estojo córneo de bovinos das raças Holandesa e Gir pelas técnicas de histomorfometria, microtomografia tridimensional e teste de microdureza. Foram coletados em frigoríficos, de forma igualitária entre as raças Holandesa (H) e Gir (G), 72 cascos (18H/18G torácicos e 18H/18G pélvicos). Os cascos foram divididos em seis grupos de acordo com a raça e a faixa etária: 24 a 36 meses, (C1H/C1G), 36 a 60 meses (C2H/C2G) e acima de 60 meses (C3H/C3G). Como modelo estatístico, realizou-se análise de normalidade e homogeneidade das variáveis morfométricas empregando testes Kolmogrov-Sminov e Bartlett. Atendidas as pressuposições, empregou-se o programa Sigmastat 3.5 e compararam-se as médias pelo teste T. Considerou-se o nível de 5% de probabilidade. Ao comparar as raças Holandesa e Gir, observou-se que não houve diferença entre elas quanto ao comprimento das papilas dérmicas. Os animais jovens apresentaram papilas mais espessas que os adultos. Os cascos da raça Holandesa apresentaram maior quantidade de poros na muralha e na sola em relação à raça Gir. Os cascos de bovinos Holandeses possuem microdureza maior que os de bovinos Gir. No estudo não se evidenciou diferença de microdureza entre cascos pigmentados e despigmentados de bovinos Holandeses e Gir.

Standardized method to obtain dermo-epidermal junction samples from bovine hoof / Método padronizado para obtenção de amostras da junção derme-epiderme do casco de bovinos

As afecções podais em bovinos causam importante impacto econômico negativo na bovinocultura. Pesquisas têm sido realizadas com o objetivo de avançar no entendimento dos processos ocorridos na junção derme-epiderme do casco de bovinos com laminite e nos demais tecidos moles durante as lesões infecciosas. Apesar disso, não foram encontrados na literatura consultada estudos que descrevessem um método padronizado para a obtenção de amostras do tecido laminar do casco. Nesse contexto, foi necessário criar e estabelecer um método viável para a colheita de amostras da junção derme-epiderme, de modo a viabilizar o estudo de pós-graduação que originou esta comunicação. O objetivo é relatar um método padronizado, testado e bem-sucedido para obtenção de amostras da junção derme-epiderme do casco de bovinos em suas regiões solear, axial e dorsal. Foram obtidos fragmentos transversais das unhas de vacas abatidas em frigorífico. A espessura desses fragmentos foi de 1,5cm, aproximadamente, e contemplava as regiões solear, axial e dorsal do casco. De forma sistematizada, amostras da junção derme-epiderme de cada uma dessas regiões foram removidas, fixadas em formol, processadas e incluídas em parafina. A análise usando microscopia de luz demonstrou cortes histológicos íntegros e sem artefatos, que permitiram ampla avaliação das estruturas tanto da derme quanto da epiderme. Concluiu-se que o método proposto viabiliza a obtenção de amostras de padrão e qualidade adequados ao estudo do tecido laminar do casco bovino.(AU)

Análise comparativa da morfometria do casco de bovinos das raças Nelore, Curraleira e Pantaneira e de bubalinos e sua relação com a etiopatogenia das enfermidades digitais / Morfometric comparative analysis of the hoof of Nelore, Pantaneira and Curraleira breeds of cattle and buffaloes and their relationship with the pathogenesis of digital diseases

O estudo morfométrico dos dígitos de bovinos e bubalinos pode colaborar para o entendimento da etiopatogenia das enfermidades podais. Este estudo objetivou descrever as características morfométricas dos dígitos de bovinos das raças Curraleira (Bos taurus), Pantaneira (Bos taurus), Nelore (Bos indicus) e de bubalinos (Bubalus bubalis) da raça Murrah e estabelecer possível relação entre tais medidas e a ocorrência de enfermidades digitais. Na pesquisa foram utilizados dez animais, saudáveis, de cada raça e espécie. Foram avaliados dois membros de cada animal, sendo um torácico e outro pélvico, totalizando 80 extremidades distais. As medidas morfométricas foram obtidas com auxílio de um paquímetro mecânico graduado e os ângulos das pinças conferidos por meio de transferidor metálico. Os principais parâmetros digitais avaliados foram o ângulo dorsal do casco (A), comprimento da parede dorsal (B), altura do talão (C), altura da pinça (D), comprimento do casco (E), comprimento diagonal do casco (F), largura do dígito lateral (G), largura do dígito medial (H), comprimento do dígito lateral (I) e comprimento do dígito medial (J). Para a comparação de médias dos resultados obtidos entre as raças foi utilizado o teste de Tukey (p<0,05). A análise multivariada para as representações gráficas das variáveis canônicas foi empregada para expressar a similaridade das medidas estudadas entre os grupos, no qual se utilizou o software R. Os resultados revelaram que os bubalinos apresentam as maiores medidas morfométricas para as variáveis B, C, D, E, F, G, H, I e J e apenas na variável A apresentaram medidas inferiores entre as diferentes raças de bovinos estudadas. Existe similaridade entre as três raças de bovinos estudadas em relação às variáveis, altura da pinça (D), largura do dígito lateral (G) e largura do dígito medial (H) as quais se distanciam dos valores encontrados para essas variáveis nos bubalinos, Concluiu que a morfometria digital pode influenciar na ocorrência de enfermidades digitais, mas não age como fator isolado, necessitando da interação com outros fatores estruturais, ambientais e de manejo para a manifestação dessas doenças.(AU)

Morfometric studies of bovine and buffalo digits can help to understand the etiopathogeny of digital diseases. This study described morphometric characteristics of digits of Curraleira (Bos taurus), Pantaneira (Bos taurus) Nelore (Bos indicus) breeds of cattle and Murrah buffalo (Bubalus bubalis) and stablish possible relation among the parameters and digital infirmities. Were used ten animals of each breed and specie. Two limbs were evaluated, a toracic and a pelvic, in a total of 80 distal limbs. Morphometric measurements were obtained using a graduated paquimeter and angles using a metallic protactor. The main parameters evaluated were hoof dorsal angle (A), dorsal wall length (B), heel height (C), toe height (D), hoof length (E), hoof diagonal hoof (F), lateral digit width (H), medial digit width (I) and medial digit length (J). For results averages comparison among breeds were used Tukey test (p<0,05). Multivariate analysys for graphic representations of canonic variables was used to express similarity of measures studied among groups, using R software. Results shows tha bubaline present higher morphometric measures for the variables B, C, D, E, F, G, H, I and J, only for variable A presented lower measures comparing the bovine breeds studied. There is similarity between the three breeds of cattle studied about toe height (D), lateral digit width (G) and medial digit width (H), which differed of values observed in buffalo. It was concluded that digital morphometry can influence the occurence of digital infirmities, but doesn´t act as an isolated factor, needing interaction of other structural, environmental and management factors for its occurence.(AU)

Estudo da correlação de medidas radiográficas indicadoras de laminite em éguas da raça Mangalarga Marchador com e sem sinais de sobrepeso / Correlation study about radiographic measurements signaling laminitis in Mangalarga Marchador mares with or without signs of overweight

A avaliação radiográfica do casco é essencial no diagnóstico e na avaliação da laminite em equinos, contudo poucos estudos têm sido feitos em raças nacionais. O objetivo deste trabalho foi realizar a morfometria de imagens radiográficas obtidas do dígito de éguas Mangalarga Marchador (MM), a fim de obter um perfil de medidas indicadoras de laminite nessa população e comparar grupos sem (escore corporal 5 e 6) e com (escore corporal 7 e 8) sinais de sobrepeso. Não houve diferença significativa entre os valores para as medidas dos dois grupos (P>0,05), mas verificou-se correlação positiva entre a distância entre os planos da linha coronária e do ápice do processo extensor (afundamento da falange distal) e indicadores de deposição de gordura localizada no pescoço e na base da cauda. Os achados demonstram que a morfometria radiográfica do dígito dessa população de equinos Mangalarga Marchador difere da de raças estrangeiras. Além disso, nos animais estudados, éguas com escore corporal 7 e 8 não aparentaram estarem mais sujeitas à laminite, uma vez que não houve diferença entre a morfometria de éguas com escore inferior. Entretanto, as correlações positivas entre índices de obesidade e a distância de afundamento da falange distal indicam que éguas Mangalarga Marchador também estão sujeitas à ocorrência de laminite associada à obesidade...

The radiographic evaluation of the hoof is essential in the diagnosis and follow-up of equine laminitis; however, few studies have been conducted in Brazilian breeds. The aim was to perform the morphometry of radiographic images taken from the digit of Mangalarga Marchador in order to obtain a profile of measurements indicative of laminitis in this population. We also compared measurements form mares without (body score 5 and 6) and with (body score 7 and 8) signs of overweight. There was no significant difference between measurements from the two groups (P> 0.05), but there was significant positive correlation between founder distance and signs of adiposity in the neck and in the base of the tail. Findings from this study demonstrate that radiographic morphology of the hoof from this population of Mangalarga Marchador mares differ from standard international reference values. Furthermore, in this group of mares, those with body condition grading 7 and 8 did not seem to be more prone to develop laminitis, since there was no difference when they were compared with mares showing lower grades. However, a significant correlation among founder distance and signs of adiposity in the neck and base of tail indicate that Mangalarga Marchador mares are also prone to obesity-associated laminitis...

Atypical digital dermatitis of bovine claw in dairy cows: clinical and histopathologic findings

Digital dermatitis is an inflammation of the skin on the bulbs of the heel which cause lameness and economic losses. Atypical digital dermatitis is a new form of an old disease which has been reported recently in the USA, UK and Netherlands. The purpose of this study is the clinical and histopathological evaluation of claw lesions with exposed corium in cases of concurrent digital dermatitis in two endemically infected herds without preventative herd strategies for BDD. The majority of non-healing claw lesion samples included in this study were taken from 'typical' clinical cases, namely, from lame cows examined in the course of veterinary practice by one author over a period of 8 months in two commercial dairy farms in Iran. Fourty five lame cows with claw lesions were selected for clinical and histopathological purposes. Examination of the affected claws revealed a topical granular appearance, painful to touch, prone to bleed with distinctive odour and extensive regional loss of the claw horn. Histologically, the epidermis was lost completely over the extension of sole ulcer lesion. The underlying dermis was intensely infiltrated by inflammatory cells, mainly polymorphic leukocytes, and in deep, newly formed capillaries were embedded in the stroma. Hyalinized thrombi were also significant in small blood vessels. In wall ulcer, there was extremely proliferative epidermis, 2-3 times with severe acanthosis and rete ridge formation. Stratum corneum was hyperplastic. The stratum corneum were filled with neutrophils, cellular debris and erythrocytes lodged in the orthokeratotic stratum corneum. In all the observed cases, the disorder included penetration through the horn capsule lesions to involve the corium, resulting in damage of the horn-forming cells. This new manifestation seems to be a combination of metabolic and infectious diseases

[Abattoir study on morphopathology of claw capsule in culling lame cows]

The majority of bovine lameness involves structures of the digit. A prompt identification of problematic cases is needed to be done for prevention of premature culling decision. This cross-sectional and descriptive study was carried out at an abattoir in the vicinity of Tehran. 41 cases of culled lame cows, with special reference to the claw lesions and their distribution were randomly selected. All amputated limb were referred to Pathology Department for more routine pathological studies by Maceration and Bleaching. In this study, postmortem examination revealed typical changes of chronic laminitis were among the most common pathological features, suggesting that laminitis may have affected virtually all the herd at some previous time. Clinical signs are as follows: the claws were much taller and more boxy than normal and the abascial wall was convex in all directions. A bark-like substance occurred on the wall in some cases. Horn quality was poor in affected claws. Asymmetrical swelling of the heel and also appreciable widening of the periople part on the affected digit were the most common clinical features. Based on the results the following conclusions were reached: 1] chronic laminitis has an important role on the trend of culling in lamecows 2] the characteristic changes in the claw in culling lame cows may provide useful on-farm diagnostic technique for culling decision or attempt for appropriate therapy, particularly in deep sepsis cases

Afecções podais em vacas da bacia leiteira de Rondon do Pará / Foot disorders in cows from basin milk of Rondon do Pará

As doenças digitais estão entre as principais causas de performance reduzida de rebanhos leiteiros. Com o objetivo de determinar a prevalência, classificar clinicamente e estabelecer os fatores epidemiológicos das enfermidades podais em vacas da bacia leiteira de Rondon do Pará, foram avaliadas 1.236 vacas, das quais 275 apresentaram pelo menos um tipo de lesão podal. Identificou-se 655 lesões, o que resultou em uma prevalência de 22,25 por cento. As enfermidades mais frequentes foram hiperplasia interdigital (80,92 por cento), necrobacilose interdigital (6,11 por cento) e cascos com crescimento excessivo (6,42 por cento). Os membros pélvicos foram os mais acometidos (61,83 por cento) e o espaço interdigital, tanto nos membros torácicos (36,34 por cento), quanto nos pélvicos (48,09 por cento), a região digital acometida com maior frequência. O estudo epidemiológico mostrou que características ambientais tais como relevo montanhoso, pastagem em formação com presença de troncos e galhos de árvores, irregularidades nos pisos dos currais, presença de piçarra e lama podem favorecer o aparecimento das lesões podais. Constatou-se a ausência de medidas de controle e profilaxia de afecções que acometem os cascos em 95,5 por cento das propriedades estudadas. O exame clínico específico do casco foi eficiente no diagnóstico das enfermidades.

Foot diseases are some of the main causes of low performance in dairy cows. In order to determine the prevalence, clinical classification and to establish the epidemio-logical factors of foot diseases in cows from basin milk of Rondon do Pará, 1,236 cows were evaluated and 275 had at least one type of foot injury. A total of 655 lesions was showed which a prevalence of 22.25 percent. Most frequent lesions were interdigital hyperplasia (80.92 percent), claw overgrowth (6.42 percent), and interdigital necrobacillosis (6.11 percent). Hind limbs were most frequently affected (61.83 percent), and lesions affecting the interdigital space were the most common in both the thoracic (36.34 percent) and hind limbs (48.09 percent). Epidemiological study showed that the environmental characteristics such as mountainous areas, newly formed grassland (with trunks and branches of trees), irregular ground, and mud and gravel in the floor of the pens may promote the development of foot lesions. In 95.5 percent of the farms, no measures had been taken for the control and prophylaxis of foot diseases. The specific clinical examination of the feet was efficient for the diagnosis.

Pitiose cutânea em bovinos na região Sul do Rio Grande do Sul / Cutaneous pythiosis in cattle in the Southern region of Rio Grande do Sul, Brazil

Descreve-se a ocorrência de pitiose cutânea em bovinos de corte na região sul do Rio Grande do Sul. Os animais foram introduzidos em área alagada e desenvolveram lesões cutâneas ulcerativas e úmidas, de tamanhos variados, localizadas na região distal dos membros e no chanfro nasal. Histologicamente, as lesões eram caracterizadas por múltiplos granulomas com hifas intralesionais, melhor observadas pela coloração de metenamina nitrato de prata de Gomori, e circundadas por abundante tecido conjuntivo fibroso. O diagnóstico foi realizado com base na epidemiologia, lesões macroscópicas e histológicas e pela reação imuno-histoquímica positiva com anticorpo policlonal anti-Pythium insidiosum. A morbidade foi de 23,8 por cento e os animais adoeceram 15-90 dias após a introdução na área alagada. Em todos os casos as lesões evoluíram para a cura sem tratamento. Sugere-se que a doença possa ser mais frequente em bovinos do que se supõe, principalmente em áreas alagadas da região Sul do Rio Grande do Sul.

An outbreak of cutaneous pythiosis is described in cattle from southern Rio Grande do Sul, Brazil. Cattle were introduced into flooded pastures and developed ulcerative and wet cutaneous lesions on distal limbs and Planum nasale. Histologically, the lesions were characterized by multiple granulomas with intralesional hyphae, better seen in the methenamine silver stain, and surrounded by abundant fibrous tissue. Diagnosis was based on epidemiology, gross and histological lesions, and by positive immuno-histochemical reaction with anti-Pythium insidiosum polyclonal antibody. Morbidity was 23.8 percent and lesions were observed 15-90 days after cattle were introduced in the flooded area. Affected cattle had spontaneous healing without treatment. It is suggested that the disease is more frequent than what was earlier thought, mainly in flooded areas of the Southern region of the Rio Grande do Sul State.

Pododermatite séptica em bovinos: evolução clínica da fase inicial / Bovine septic podermatitis: clinial evolution of the early stage

Esse estudo objetivou caracterizar clinicamente a fase inicial da pododermatite séptica em bovinos. Foram utilizadas 30 fêmeas bovinas, Girolando, de propriedades rurais do Estado de Goiás, submetidas às mesmas condições de manejo. Após o diagnóstico, foram submetidas a exame clínico específico dos dígitos, diariamente, por um período de quinze dias. Considerou-se o término da fase inicial a presença de fístula no espaço interdigital ou quando se completava o período de observação. Foram identificados o tipo de solo e o período do ano (chuvoso e seco). Durante a evolução da doença, o edema e a sensibilidade intensificaram de forma progressiva. Em 73,33% dos casos, a enfermidade ocorreu no membro pélvico. Em 50,00% observou-se edema moderado e 26,67%, edema acentuado, considerando ambos os membros. A fistulação ocorreu em 83,33% animais doentes até o sexto dia, em 10% entre o sétimo e o décimo primeiro dia e em 6,67% não ocorreu. As áreas de fistulação ocorreram no ponto médio do espaço interdigital em 63,33%; na região dorsal do espaço interdigital em 16,67% e no cório-coronário da região abaxial do estojo córneo em 10,00% e na porção palmar/ plantar entre os talões em 3,33% dos casos. A pododermatite séptica apresentou os mesmos sinais clínicos nas propriedades avaliadas e nos diferentes períodos do ano, variando apenas o tempo e o local de fistulação. O tempo médio transcorrido entre o diagnóstico e o a fistulação foi de cinco dias, sendo que o local de maior ocorrência foi o ponto médio do espaço interdigital.

This study aimed to describe the clinical signs of the initial phase of septic pododermatitis in thirty female girolando bovines under the same handling care from different farms in State of Goiás. Following the diagnosis, they were submitted to daily clinical examination of the hoofs during fifteen days. It was considered as the end of the initial phase the presence of fistula in interdigital space or when the observation time over. It was observed the farm’s soil type and the period of the year (if rainy and dryness). During the disease evolution, edema and pain increased in progressive order until skin disruption and fistula formation. In 73,33%, the illness envolved the hind limbs. In 50,00% it was observed moderate edema and 26,67% intense edema in both limbs. Fistula occurred in 83,33% ill animals until sixth day, in 10% between seventh and eleventh days and in 6,67% of the cases it was’t observed. Fistulation areas were middle point of interdigital space in 63,33%; dorsal region of interdigital space in 16,67% and in coronary corium of the abaxial region of the hoof in 10,00% and in palmar/plantar region between coronary cushion in 3,33% of cases. The septic pododermatitis showed the same clinical signs in farms considered in this study and in different periods of the year, differing in time and fistula site. The average time from diagnosis and fistulation was five days. The more commom site was the middle point of the interdigital space.

Histologic alterations of the basement membrane of the dermal and epidermal layers of the hoof in horses with acute laminitis

Fueron estudiadas las características morfológicas de los cascos de dos grupos de equinos. El primer grupo, conformado por cinco animales adultos, sin ninguna alteración clínica, correspondió al grupo control. El siguiente grupo, constituido por siete equinos recibieron 17,6g/kg de carbohidratos por vía oral, para la inducción de laminitis. De este grupo, 71 por ciento desarrolló la sintomatología entre 36 y 48 horas después de la administración del carbohidrato. Pasadas 48 h de la inducción de laminitis, los animales fueron sacrificados y sus miembros fueron retirados para realizar los respectivos estudios histológicos. Se efectuaron cortes histológicos de 5 a 7µm de grosor y, posteriormente, se tiñeron con hematoxilina-eosina (HE) y ácido peryódico de Schiff (PAS) para ser sometidos a microscopía óptica. A través de la coloración de HE, fue posible determinar alteraciones en la arquitectura de las láminas epidérmicas primarias y secundarias, las cuales se presentaron delgadas y anchas, con los núcleos de las células basales de forma arredondada y, eventualmente, localizados en su polo basal. La coloración por el PAS, permitió observar la membrana basal y la matriz proteica, separando las láminas epidérmicas y dérmicas y definiendo la morfología de éstas. En los equinos del grupo con laminitis se observaron deformación y fragmentación de la membrana basal. La utilización del PAS permitió determinar las alteraciones degenerativas graves en la membrana basal, de presentación precoz y coincidiendo con el desarrollo de los signos clínicos de claudicación.

Glucocorticoid-induced laminitis with hepatopathy in a Thoroughbred filly

A 3-year-old Thoroughbred filly was referred to the Equine Hospital, Korea Racing Association for evaluation of hematuria, inappetite, weight loss and depression. From 25 days prior to admission, the horse was treated for right carpal lameness with 20 mg intramuscular administration of triamcinolone acetonide per day for consecutive 10 days by a local veterinarian. Clinical and laboratory findings included vaginal hyperemia, flare in bladder wall, neutrophilia, lymphopenia, polyuria, polydipsia and laminitis in the end. High activities of aspartate transaminase and gamma glutamyltransferase and high concentration of total bilirubin indicated hepatopathy. Further hematology, serum biochemistry and urinalysis did not reveal any abnormalities. Medical history, physical and clinicopathologic findings suggest that the laminitis and hepatopathy in this horse were most likely induced by repeated administration of exogenous corticosteroid. However, guarded prognosis of treating laminitis undermined the benefit of improvement of hematuria following electroacupuncture stimulation. The combined stimulation of kidney related acupoints (Shen Peng, Shen Shu), lumber related acupoints (Yao Qian, Yao Zhong) and associate acupoints (Guan Yuan Shu, Bai Hui) at 5Hz, 1-2V, for 40 minutes was of value in the treatment of hematuria. This case shows that horses under steroids may exhibit laminitis and steroid hepatopathy. Early recognition and good management of laminitis are important in the limitation of complications.